自体脂肪隆胸要多钱(精彩20篇)

脂肪填充是一种目前比较流行也比较常见的手术，这个手术是一种可以重塑我们面部轮廓的一种手术，但是如果做了这个手术后悔了怎么办呢，今天就一起来看看吧！

脂肪填充泪沟后悔了怎么办

一般自体脂肪填充泪沟适合眼眶下面软组织萎缩导致的泪沟，对于年轻型没有眼袋的人来说，只是注射玻尿酸来改善泪沟就好了。自体脂肪可以填充泪沟，自体脂肪填充泪沟是从身体某些部位吸取多余的皮下脂肪细胞移植到泪沟处，达到泪沟填充的效果的手术，可以说这是一种填充泪沟很常用的手术。

脂肪填充优势

01.取材安全

利用自体血清、脂肪进行填充，没有外来材料的异物感，无排斥。

02.永久存活

纯脂肪中含有干细胞，从而提高存活力，并可促进胶原蛋白再生。

03.微创注射

仅需注射，无切口，不伤及任何神经组织，无针眼，为恢复期，可快速回归日常生活。

04.效果明显

整体脸部赋予自然的饱满感，肤质细腻光滑，更加富有弹性的童颜效果。

05.综合性强

纳米脂肪移植可以结合化学换肤、激光换肤等面部年轻化手术，彻底改善肤质，创造更年轻的外观。

脂肪填充成活率

事实上人类对纳米脂肪细胞的研究已有百年历史，但由于成活率的问题，脂肪移植并没有得到医学的认可和应用。直到最近20年，随着脂肪抽吸的成功，整形专家们将目光再次聚焦到脂肪移植。纳米脂肪细胞技术，包括用于脂肪移植的专利器械和一整套贯穿于脂肪移植全过程的技术规范，不仅确切提高了脂肪移植的成活率，还可获得更好的塑形稳定性和精确性。

脂肪填充术后恢复

全脸脂肪填充虽然恢复很快但也是需要一个过程，与术后的保养护理有着很大关系。第4天的时候最肿，在手术后第2天最好使用酒精棉球清洁创口，擦去创口表面血痂，保持干燥，待创口自行愈合后5-7天拆即可拆线。还有就是要戒烟戒酒，避免吃刺激性食物，面部填充后应进食冷流质，避免切口烫伤裂开;术后一月内应慎戴有框眼镜，避免外力造成鼻假体移位。如果在进行面部填充后出现肿胀现象，可能会因为由于面部血液循环丰富较为剧烈，但不会疼痛，这是很正常的一种现象，会很快消退，这与手术的操作和病人凝血机制缺陷等因素有关。通常多数人做完面部填充后肿胀都不重，一般10天左右就变得比较自然了。

有一个饱满的苹果肌不但好看，还会显得很年轻，自体脂肪就能丰苹果肌，那么自体脂肪丰苹果肌多久可以洗脸，自体脂肪丰脸后多久能恢复。

自体脂肪丰苹果肌多久可以洗脸

自体脂肪丰面颊后不能立刻洗脸，由于注射部位伤口沾水容易感染。一般来说，自体脂肪丰面颊术后3-5天之前禁止沾水，可以采取用湿纸巾轻微擦拭，不宜太过用力。一周后基本可以沾水洗脸，但是前期不能用洁面产品，一月之后才可以使用香皂和洗面奶进行洗漱，避免污水和洗漱品发生不良反应，影响效果。

同时需要注意的是，吸脂部位也不能太快沾水，不然很容易引发感染，要保持清洁干燥，做好护理工作和一些注意事项，才有助于恢复，呈现最佳的效果。

自体脂肪丰脸后多久能恢复

自体脂肪丰脸效果很好，恢复也很快，这跟术后的护理分不开的(怎么有效地护理)，求美者一定要根据医生的嘱咐，做好相关的护理工作，使得缩短恢复的时间，更快的看到预期的丰脸效果，一般都是5-7天恢复好，注射后第二天就可以上班，也不耽误正常的生活，深受求美者的青睐。

自体脂肪丰脸安全吗

自体脂肪丰脸是通过自体脂肪注射到脸颊部位，从而实现丰脸效果。(对以后会有什么影响)自体脂肪丰脸采用自身的脂肪为注射材料，非常的安全可靠，无副作用，而且还有很好的相容性，稳定性也很强，效果非常的真实美丽，健康圆润的脸颊即可呈现。

自体脂肪丰苹果肌多少钱

爱美者是抽取自体脂肪丰苹果肌的，但是前提是脂肪颗粒必须足够纯净，若是脂肪不够纯净，那么纯化的力度就大，自然价格也会偏高。每个医院的就医环境、医师团队、仪器设备都是不一样的，这些都会影响手术效果，医师越是专业，那么手术的效果自然也好，一个普通的医师和一个专业的医师，其价格也是会相差甚多的。根据爱美者自身苹果肌的凹陷程度，抽取的脂肪量不同，那么植入的多少也有所区别，所以就会影响价格的高低。

脂类是油、脂肪、类脂的总称。食物中的油脂主要是油和脂肪，一般把常温下是液体的称作油，而把常温下是固体的称作脂肪。

脂类也称脂质。它包括两类物质。

一类是脂肪

脂肪又名中性脂肪，是由一分子甘油和三分子脂肪酸组成的甘油三酯。

中性脂肪即甘油三脂，是猪油、花生油、豆油、菜油、芝麻油的主要成分。

另一类是类脂

类脂与脂肪化学结构不同，但理化性质相似。在营养学上较重要的类脂有磷脂、糖脂、胆固醇、脂蛋白等。由于脂类中大部分是脂肪，类脂只占5%并且常与脂肪同时存在，因而营养学上常把脂类通称为脂肪。

磷脂：卵磷脂、脑磷脂、肌醇磷脂。

糖脂：脑苷脂类、神经节昔脂。

脂蛋白：乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白。

类固醇：胆固醇、麦角固醇、皮质甾醇、胆酸、维生素D、雄激素、雌激素、孕激素。

在自然界中，最丰富的是混合的甘油三酯，在食物中占脂肪的98%，在身体里占如28%以上。所有的细胞都含有磷脂，它是细胞膜和血液中的结构物，在脑、神经、肝中含量非常高，卵磷脂是膳食和体内最丰富的磷脂之一。四种脂蛋白是血液中脂类的主要运输工具。

连续喝一星期就能减肥的「排毒燃脂汤」，一直都受到相当大的注目，但每天连续喝也会让人厌烦。其实，在海外有许多创意排毒燃脂汤食谱喔♪赶快一起试着将美味的排毒燃脂汤加入你的得意料理清单当中，并顺便养成美丽习惯吧!

燃烧脂肪排毒汤食谱

燃烧脂肪排毒汤食谱①鸡肉排毒汤

使用了鸡胸肉、红萝卜、花椰菜等蔬菜所完成的汤品。这锅汤能够一次摄取充足蔬菜，非常适合拿来当作减肥食谱喔，使用了便宜价格的鸡胸肉就能够填饱肚子，这种汤品觉得如何呢?以橄榄油搭配芹菜、生姜或大蒜拌炒，接着加入鸡胸肉小火炖煮20分钟。等到鸡胸肉出汁后再取出，并加入花椰菜、红萝卜等蔬菜熬煮到软嫩。最后将鸡胸肉撕成鸡丝再加入就完成啰。

燃烧脂肪排毒汤食谱②绿色蔬菜排毒汤

含有花椰菜、豌豆、芹菜的绿色蔬菜排毒汤。只需要将食材用食物调理机先打碎，再加入洋葱清汤及调味料即完成。绿色蔬菜内含有非常多天然维他命，另外再依照喜好加入坚果的话，就能完成看起来超美味的排毒汤。

燃烧脂肪排毒汤食谱③美味健康排毒汤

接下来是使用了大量蒜头、芹菜、韭菜等蔬菜的健康食谱。加入带有苦味的甘蓝菜、节瓜、番茄等蔬菜，立刻就完成了能够补充维他命&排毒的汤品。大蒜香味绝对会让你感到超满足喔！

燃烧脂肪排毒汤食谱④姜黄番茄排毒汤

感受到香料与番茄超match的这道汤品，同时也有苹果醋的清爽味道隐藏其中。使用了椰子油拌炒洋葱及大蒜，再加入姜黄与番茄熬煮至入味。蔬菜变软之后加入苹果醋及罗勒叶，沸腾后用食物调理机搅拌成滑顺口感，就完成了香气十足的汤品。加入了大量番茄的这道汤品，对于改善宿醉也很有效果。另外，番茄也有消炎的功效，非常适合肠胃不好的人。

美味的燃脂排毒汤，可以一次大量做好之后放置冰箱保存，想要吃的时候再拿出来重新加热即可。不论是累积疲劳的身体，或是想要减肥时都很适合，大家赶快试试用温暖汤品来燃烧脂肪吧!

一些将肽或多肽结合到聚(乙二醇)PEG和类似的水溶性聚(环氧烷)的初始概念公开于美国专利4,179,337中，其公开内容通过引用并入本文中。用这些聚合物改性的多肽显示出降低的免疫原性/抗原性，并且在血液中循环的时间比未改性的形式更长。

为了结合聚(环氧烷)，将一个羟基末端基团转化成反应性官能团。该过程常被称为“活化”，并且该产品被叫做“活化的聚(环氧烷)”。其它基本上非抗原性的聚合物类似地被“活化”或官能化。

将所述活化的聚合物与具有用作连接位点的亲核官能团的治疗剂反应。通常用作连接位点一个亲核官能团为赖氨酸的Ε-氨基。游离羧酸基团、适当地活化的羰基基团、氧化的糖部分和巯基基团也已经用作连接位点。

胰岛素和血红蛋白是其中第一个结合的治疗剂。这些相对大的多肽包含数个游离的Ε-氨基连接位点。可连接足够数量的聚合物以降低免疫原性和增加循环寿命而不显著丧失生物活性。

然而，过量的聚合物结合和/或涉及治疗部分的活性位点的结合，在所述位点中发现与生物活性相关的基团，经常导致丧失活性并因此带来治疗用处。这经常是对于具有较低分子量的肽，常常是这种情况，所述肽几乎没有不与生物活性相关的连接位点。许多非肽治疗剂还缺乏足够数量的连接位点以获得聚合物改性的益处。

克服上述问题的一个建议是使用更长的、更高分子量的聚合物。然而，取决于需要的分子量，这些材料可能难于制备和使用昂贵。另外，它们有时几乎没有提供相对于更易获得的聚合物的改进。

另一个可选的建议是将两个聚合物链通过三嗪环连接于蛋白质的氨基上。参见例如Enzyme，26，49-53(1981)和Proc.Soc.Exper.Biol.Med.，188，364-9(1988)。然而，三嗪是有毒的物质，其在结合后难于降低至可接受的水平。另外，三嗪为平面型基团并仅可被双聚合物取代。所述平面结构严格地将所述两个聚合物链锁定在位。这将聚合物结合的益处限制到与通过增加聚合物链长度而获得的益处类似相同的程度。因此，基于非三嗪的活化的聚合物将对现有技术提供实质的益处。

然而，在上述情况下，形成的生物活性聚合物共轭物具有在所述聚合物和母体生物活性部分之间基本上耐水解的键(键合)。因此，制备了永久性连接的长效共轭物，而不是前药本身(其中母体分子最后在体内被释放)。

共同转让的美国专利5,643,575、5,919,455和6,113,906公开了另外的改进，该改进涉及具有通过脂肪族接头连接于亲核体的共同的点的PEG的多条链。与早期的基于三嗪的分支聚合物共轭物不同，所述脂肪族接头使本领域技术人员避免三嗪的毒性以及提供其它有用的优点。

另外，经过很多年，还已经提出了制备前药的数种方法。前药包括生物活性母体化合物的化学衍生物，其在给药后，将在体内最终释放所述活性母体化合物。前药的使用使本领域技术人员可以改变在体内生物活性化合物的作用的开始和/或持续时间。前药经常是所述母体或活性化合物的生物惰性的或者是基本上失活的形式。所述活性药物的释放速率被数个因素影响，所述因素包括将母体生物活性化合物结合于前药载体的接头的水解速率。

一些基于酯或磷酸酯键合的前药已经有报道。在大多数情况下，用于形成前药的酯键的具体类型提供对于在水性环境中水解的T1/2为为高达数天。尽管人们期待已经形成了前药，但大部分所述共轭物在体内完成充分水解之前就被排除了。因此优选提供具有允许所述聚合物-药物的键合在体内更快速水解的键的前药，以更迅速地形成母体药物化合物。

基于酰胺或氨基甲酸酯键合的前药也已经被报道。通常，酰胺键已知具有高度耐水解性。然而，最近已经发现，当用一个或两个羟基乙基基团将N-端进行N-羟基乙基化时，Ε-氨基酸的C-端酰胺在25℃和PH 7.4下易于水解。双N-2-羟基乙基甘氨酸(N-二(羟乙基)甘氨酸)型分子对于这样的水解反应是关键的。这样的N-二(羟乙基)甘氨酸型基团已经被用于合成前药，参见共同转让的美国专利申请10/218,167和10/449,849。

对于在前药设计的领域中仍有改进的空间。本发明提供这样的改进。

发明内容

在本发明的一个方面，提供式(I)的化合物

其中R1选自基本上非抗原性的聚合物残基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳烷基和末端支链基团;Z和Z′是相同或不同的，并独立地选自活性转运到目标细胞中的部分、疏水部分、双官能接头及其组合;Y1-3可以相同或不同，并选自O、S或NR11;L1和L3独立地为双官能功能接头;R3-R11、R24和R25可以相同或不同，并选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代环烷基、芳基、取代芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和C1-6杂烷氧基;L2选自-C(O)(CR30R31)Y15(CR32R33)C(O)NR35-或-C(O)(CR30R31)(CR32R33)C(O)NR35-其中Y15选自O、S、NR34或CH2，和R30-35可以相同或不同，并选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基或芳基;A和A′可以相同或不同，并独立地选自烷基、离去基团、官能团、诊断试剂、靶向部分、生物活性部分和OH;A、G、E可以相同或不同，并可独立地为0，或约1至约5的正整数，优选0或1;B、C、D和D′可以相同或不同，并可独立地为0或1，和M、N、O和P可以相同或不同，并可独立地为约1至约6的正整数，条件是(A+E)等于或大于1。

本发明的另一个方面包括当R1为包括Α和Ω末端连接基团二者的聚合物残基时形成的双官能化合物。在本发明的这个方面中，本领域技术人员能够将两个当量的生物活性试剂药物、蛋白质、多肽、寡核苷酸、诊断试剂等连接于聚合物(优选PEG)的N-二(羟乙基)甘氨酸体系上。这些双官能聚合物共轭物的例子以下式(II)说明 其中，Z和Z′独立地为双官能连接基团或 其中Y4为O、S或NR11并且L5为双官能接头，并且所有其它的变量为如上所述的那样。

还提供制备本发明化合物的方法和利用其进行治疗的方法。

为了本发明的目的，术语“残基”应当被理解为指其所指的化合物的部分，其在经历取代反应后保留，在所述取代反应中聚合物前药载体部分已经被连接。

为了本发明的目的，术语“聚合物残基”或“PEG残基”应当各自被理解为指聚合物或PEG的部分，该部分在其经历与生物活性化合物反应后保留。

为了本发明的目的，术语“烷基”应当被理解为包括直链的、支链的、取代的，例如卤代-、烷氧基-、硝基-的，C1-12烷基、C3-8环烷基或取代的环烷基，等。

为了本发明的目的，术语“取代的”应当被理解为用一个或多个不同原子加成或替代一个或多个包含于官能团或化合物中的原子。

为了本发明的目的，取代烷基包括羧基烷基、氨基烷基、二烷基氨基、羟基烷基和巯基烷基;取代烯基包括羧基烯基、氨基烯基、二烯基氨基、羟基烯基和巯基烯基;取代的炔基包括羧基炔基、氨基炔基、二炔基氨基、羟基炔基和巯基炔基;取代环烷基包括例如4-氯代环己基的部分;芳基包括例如萘基的部分;取代的芳基包括例如3-溴-苯基的部分;芳基烷基包括如甲苯甲酰基的部分;杂烷基包括如乙基噻吩的部分;取代杂烷基包括如3-甲氧基-噻吩的部分;烷氧基包括如甲氧基的部分;和苯氧基包括如3-硝基苯氧基的部分。卤代-应当被理解为包括氟代、氯代、碘代和溴代。

为了本发明的目的，术语“足量”应当被理解为达到如本领域普通技术人员理解的效果的治疗效果的量。

为了本发明的目的，“有效的非抗原性的”和“基本上非抗原性的”应当被理解为包括所有在本领域中理解为在哺乳动物中基本上无毒的和不引起可感知的免疫应答的聚合物材料。

为了本发明的目的，“正整数”应当被理解为指正的整数，优选约1至6并更优选1或2。

本发明的一个主要优点是N-二(羟乙基)甘氨酸接头使得可以对前药的水解速率进行控制，因此在体内以及在体外，在不同的速率下释放天然实体。例如，多种双官能部分，包括氨基酸或短肽残基可被包括作为任何L1-3的部分以调节所述前药在体内和体外的水解速率和/或细胞吸收等。

本发明的另一个优点是通过将所述聚合物部分连接于所述N-二(羟乙基)甘氨酸体系的仅一个臂上，该结合过程是更纯净的和更快速的。

本发明的另一个优点是由于在水解过程中很少或不形成杂质或副产物而改进了代谢特性。这种不形成杂质还导致更易于纯化。

本发明的又一个优点是可以将靶向部分以及生物活性部分，即药物，两者都连接于相同的聚合物平台上，从而增加具有增强的治疗有效性的可能性。

本发明的另一个优点是通过这种新型聚合物转运系统递送的目标化合物经常证明在水溶解性方面和体内循环寿命方面可测量的增加，尤其在小分子的情况下。

附图说明

图1-5示意性说明详细描述于说明书和实施例中的形成本发明化合物的方法。

本发明的详细说明A.式(I)在本发明的一个实施方案中，提供式(I)的化合物

其中R1选自基本上非抗原性的聚合物残基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳烷基和末端支链基团;Z和Z′是相同或不同的，并独立地选自活性转运到目标细胞中的部分、疏水部分、双官能接头及其组合;Y1-3可以相同或不同，并选自O、S或NR11;L1和L3独立地为双官能接头;R3-R11、R24和R25可以相同或不同，并选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代环烷基、芳基、取代芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和C1-6杂烷氧基;L2选自-C(O)(CR30R31)Y15(CR32R33)C(O)NR35-或-C(O)(CR30R31)(CR32R33)C(O)NR35-其中Y15选自O、S、NR34或CH2，和R30-35可以相同或不同，并选自H、烷基、烯基、炔基、杂烷基或芳基;A和A′可以相同或不同，并独立地选自烷基、离去基团、官能团、诊断试剂、靶向部分、生物活性部分和OH;A、G、E可以相同或不同，并可独立地为0，或约1至约5的正整数，优选0或1;B、C、D和D′独立地为0或1，和

M、N、O和P独立地为正整数，条件是(A+E)等于或大于1。

在本发明某些优选的方面，R1包括基本上非抗原性的聚合物残基，例如聚乙二醇(PEG)基团。任选地，R1包括在本文命名为J的封端基团。优选的用于聚合物封端的J基团包括如OH、NH2、SH、CO2H的部分，C1-6烷基部分，例如甲基，和式(III)的化合物 其中所有的变量为如上所定义的那样。

关于包含本发明的化学式的其它变量，下述内容在本发明某些方面中是优选的在某些方面，R1为聚环氧烷残基，并更优选聚乙二醇残基;在另一些方面，R1为更详细描述于下的基于N-二(羟乙基)甘氨酸的末端支链基团以允许装载多个聚合物链;在另一个方面，A优选为官能团或生物活性部分，并且A′为官能团、靶向部分或诊断试剂;R3-R11，和R24-25各自为氢，和A、B、C、E、M、N、O和P各自优选为1。

优选地，Z和Z′为如上所述的 或可另选地包含氨基酸残基，肽残基，被活性转运到目标细胞中、疏水的或具有这些性质的组合的基团，使得当与生物活性A基团组合时，形成前药，其从式(I)和(II)的N-二(羟乙基)甘氨酸聚合物部分释放。同样参见共同转让的USSN 09/758,993，其内容通过引用并入到本文中。

B.基本上非抗原性的聚合物如上所述，R1优选为水溶性聚合物残基，该聚合物残基优选是基本上非抗原性，例如，聚环氧烷(PAO)和更优选为聚乙二醇，例如MPEG。为了说明而非限制的目的，R1的聚乙二醇(PEG)残基部分可选自J-O-(CH2CH2O)X-，J-O-(CH2CH2O)X-CH2C(O)-O-，J-O-(CH2CH2O)X-CH2CH2NR12-，J-O-(CH2CH2O)X-CH2CH2S-，-OC(O)CH2-O-(CH2CH2O)X-CH2C(O)-O-，-NR12CH2CH2-O-(CH2CH2O)X-CH2CH2NR12-和-SCH2CH2-O-(CH2CH2O)X-CH2CH2S-其中X为聚合程度;R12选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-12支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代环烷基、芳基、取代芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和C1-6杂烷氧基，和J为关于式II如上所述的封端基团。

在一个特别优选的实施方案中，R1选自CH3-O-(CH2CH2O)X-，CH3-O-(CH2CH2O)X-CH2C(O-O-，CH3-O-(CH2CH2O)X-CH2CH2NH-和CH3-O-(CH2CH2O)X-CH2CH2S-，其中X为正整数，优选选择使得重均分子量为约2,000至约40,000Da。在本发明可选的方面中，取决于本领域技术人员的需要，所述聚合物的分子量为数百直至40,000或更大。

同样预计落入本发明的范围中，R1选自描述于共同转让的美国专利5,605,976、5,643,575、5,919,455和6,113,906中的支化的聚合物残基，每篇专利的公开内容通过引用并入本文中。在这些通式中，优选如下的结构式 其中(Q)为约1至约5的整数;Z″为O、NR13、S、SO或SO2;其中R13为H、C1-8烷基、C1-8支链烷基、C1-8取代烷基、芳基或芳烷基;(H)为0或1;(K)为正整数，优选约1至约6。

预计落入本发明范围内的其它支化活性聚合物优选选自描述于共同转让的PCT公开号WO 02/065988和WO 02/066066中的那些化合物，每篇专利的公开内容通过引用并入本文中。在这些通式中，优选如下结构式 其中R1为聚合物残基，如PEG。

在另一个优选的实施方案中，R1为下式的聚合物残基 其中R1为聚合物残基，如PEG;

W为双官能接头，如O、氨基酸、 -(CH2)Y、和-NH(CH2CH2O)2-;Z为0、1、2、3或4;N为正整数，优选约1至约500，更优选约200，和Y为正整数，优选约1至约6。

PEG通常由如下结构表示 并且R1′优选包括该式的残基。

所述聚合物(X)的聚合程度可以为约10至约2,300。其表示在所述聚合物链中重复单元的数量并且取决于所述聚合物的分子量。优选地，X为正整数，其被选择以使得重均分子量为约2,000至约40,000Da。所述(J)部分为如本文中所定义的封端基团，即在所述聚合物的末端出现的基团，在某些方面，可选自NH2、OH、SH、CO2H、C1-6烷基或其它PEG末端活化基团，如本领域技术人员了解的那些基团。

同样有用的为聚丙二醇，支化的PEG衍生物，如描述于共同转让的美国专利5,643,575(′575专利)中的那些，“星形-PEG”和多臂PEG，如描述于Shearwater Corporation的2001年价目表“Polyethylene Glycoland Derivatives For Biomedical Application”中的那些。每篇上述专利的公开内容通过引用并入本文中。由′575专利提供的支化允许从N-二(羟乙基)甘氨酸基团二级或三级支化，以此方式，在生物活性分子或酶上从单个连接点增加聚合物负载。应当理解的是，如果需要，所述水溶性聚合物可被功能化用于连接所述双官能接头基团，而无需过度的实验。

在本发明的大部分方面，尽管PAO和PEG可在重均分子量方面相差很大，但优选R1和R1′可具有重均分子量为约2,000至约40,000Da。

本文中包括的聚合物物质优选为在室温下是水溶性的。这些聚合物的非限制性的列举包括聚环氧烷均聚物，如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇，聚氧基乙基化的多羟基化合物，其共聚物和其嵌段共聚物，只要保持所述嵌段共聚物的水溶性。

在另外的实施方案中，并且作为对基于PAO的聚合物的备选方案，R1和R1′可任选选自一种或多种有效地非抗原性的材料，如葡聚糖、聚乙烯醇、基于糖的聚合物、羟基丙基甲基丙烯酰胺(HPMA)、聚环氧烷和/或其共聚物。同样参见共同转让的美国专利6,153,655，其内容通过引用并入本文中。本领域普通技术人员可以理解的是如本文中所描述的采用与用于PAO如PEG的相同类型的活化。本领域普通技术人员将进一步意识到上述列举仅为示例性的并且构思了所有具有本文中描述的品质的聚合物材料，并且还构思了其它聚环氧烷衍生物，如聚丙二醇等。

本发明的聚合物还可与双官能材料，例如聚(烷撑二醇)二胺共聚以形成穿插的聚合物网络，其适用于有渗透性的隐形眼镜、创伤敷料、药物递送装置等。本领域普通技术人员将容易认识到这种支化的位阻限制和水溶性。然而，优选多支化聚合物的分子量不应超过80,000道尔顿。

C.双官能接头基团L1、L2、L3和L5在本发明的许多方面，和特别是式(I)中，L1和L3为连接基团，其使得所述N-二(羟乙基)甘氨酸衍生物连接于聚合物链或其它部分，例如R1和A′。所提供的键可以是，直接的或者通过本领域技术人员已知的另外的结合基团。其它L基团在本说明书中被提及并且它们被理解为选自与L1相同的基团。尽管L2和L5在下文中被进一步描述，但在本发明的一个方面中，L1和L3独立地选自

-NR19(CR14R15)TO-，-NR19(CR14R15)T(CR16CR17O)SNR19-，-O(CR14R15)TNR19-，-O(CR14R15)TO-，-NR19(CR14R15)TNR19-，-NR19(CR14R15)T(CR16CR17O)S-，-NR19(CR16CR17O)T-，-NR19(CR16CR17O)T(CR14R15)SNR19-，-NR19(CR16CR17O)T-，-O(CR14R15)T-NR19-，-O(CR14R15)TNR19-，-O(CR14R15)TO-，-O(CR16CR17O)TNR19-， 其中R14-R17和R19独立地选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代环烷基、芳基、取代芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和C1-6杂烷氧基;和R18选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代环烷基、芳基、取代芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和C1-6杂烷氧基、NO2、卤代烷基和卤素;和T和S为独立地选择的正整数，优选约1至约4。

在本发明的另一些方面，L1和L3可包括氨基酸残基。所述氨基酸可选自任何已知的天然存在的L-氨基酸，例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、脯氨酸和/或其组合，仅以这些为例。当L1包括肽时，所述肽大小不同，例如，约2至约10个氨基酸残基。在一个优选的实施方案中，所述肽为Gly-Phe-Leu-Gly。

所述氨基酸残基优选为下式 其中X′为O、S或NR26，Y5为O、S或NR27，并且R26、R27和R28独立地选自与定义R3相同的基团，但各自优选为H或低级烷基(即C1-6烷基);并且F为约1至约10的正整数，优选1。

天然存在的氨基酸的衍生物和类似物，以及多种本领域已知的非天然存在的氨基酸(D或L)，疏水的或非疏水的，同样落入到本发明的范围内。仅仅举例来说，氨基酸类似物和衍生物包括2-氨基己二酸、3-氨基-己二酸、Β-丙氨酸、Β-氨基丙酸、2-氨基丁酸、4-氨基丁酸、哌啶酸、6-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基异丁酸、3-氨基异丁酸、2-氨基庚二酸、2，4-氨基丁酸、锁链赖氨素、2，2-二氨基庚二酸、2，3-二氨基丙酸、N-乙基-甘氨酸、N-乙基天冬酰胺、3-羟基脯氨酸、4-羟基脯氨酸、异锁链赖氨素、别-异亮氨酸、N-甲基甘氨酸、肌氨酸、N-甲基异亮氨酸、6-N-甲基-赖氨酸、N-甲基缬氨酸、正缬氨酸、正亮氨酸、鸟氨酸和其它太多以致不能提及的，它们列举于63 Fed.Reg.，29620，29622中，其通过引用并入本文中。

短肽为例如得自如前所述的2至约10或更多个氨基酸残基的肽。

更优选地，L1和L3独立地选自

-NH(CH2CH2)2O-，-NH(CH2CH2)(CH2CH2O)NH-，-O(CH2CH2)NH-，-O(CH2CH2)O-，-NH(CH2CH2)NH-，-NH(CH2CH2)(CH2CH2O)-，-NH(CH2CH2O)-，-NH(CH2CH2O)(CH2)NH-，-NH(CH2CH2O)2-，-O(CH2)3NH-，-O(CH2)3O-，-O(CH2CH2O)2NH-。

在本发明的另一个实施方案中，L2选自-C(O)CR30R31OCR32R33C(O)NR35-;-C(O)CR30R31NR34CR32R33C(O)NR35-;-C(O)CR30R31SCR32R33C(O)NR35-，或-C(O)(CR30R31)NC(O)NR35-;其中R30-35独立地选自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6杂烷基或芳基，和N为正整数，优选约1至约3。

优选地，L2选自-C(O)CH2OCH2C(O)NH-;-C(O)CH2NHCH2C(O)NH-;-C(O)CH2SCH2C(O)NH-;-C(O)CH2CH2CH2C(O)NH-，或-C(O)CH2CH2C(O)NH-.。

本发明的主要的优点为本领域技术人员可控制水解的速率或生物活性部分或药物从所述聚合物N-二(羟乙基)甘氨酸平台上的释放速率。取决于选择的特定接头，本领域普通技术人员可将所述化合物改性以控制水解速率。本发明该优选的方面允许本领域技术人员调节所述生物活性物质递送到希望的目标的速率。在需要所述生物活性部分或药物的快速释放的情况下，L2接头的并入提供增强的水解速率。相反，对于公开于共同转让的美国专利申请10/218,167中的早期基于N-二(羟乙基)甘氨酸的聚合物平台，其中所述部分或药物从所述平台的释放经常依赖于例如PH或酶的存在的条件，所述接头L2由于邻位协助，能够显著增强所述生物活性部分或药物从所述聚合物平台释放，而不依赖于PH条件或在酶存在或不存在的条件。然而，在酶存在下，水解的速率将或者通过如果可适用的邻助作用，或者通过酶反应，而控制，选择其中更快的一种。因此，水解的速率高度依赖于在所述N-二(羟乙基)甘氨酸部分本身和所述PEG部分之间所用的接头的类型。

D.Z和Z′部分和它们的功能在本发明的一个方面，Z和Z′为L5-C(=Y4)，其中L5为双官能接头并选自与L1相同的基团，并且Y4选自与Y1-3定义相同的基团。在本发明的这个方面，Z和Z′基团用作在A基团和所述N-二(羟乙基)甘氨酸转运形式的剩余部分之间的连接。

在本发明的其它方面，Z和Z′基团为被活性转运到目标细胞中的部分，疏水部分，及其组合。尽管Z和Z′优选为单价的，但它们可任选为二价或多价的以使得多于一个A基团连接于基于N-二(羟乙基)甘氨酸的聚合物。为了获得所述活性转运，Z和Z′可包括氨基酸、肽残基或聚胺残基，例如任何上述关于L1的那些、糖残基、脂肪酸残基、C6-18烷基、取代芳基、杂芳基、-C(=O)、-C(=S)或-C(=NR29)，其中R29为H、低级烷基等。

本发明的这个方面广泛基于这样的原理适合于并入到基于N-二(羟乙基)甘氨酸-聚合物的前药共轭物的生物活性材料自身可以是在从N-二(羟乙基)甘氨酸连接的组合物中水解释放后没有活性物质/化合物，但其在经历进一步化学过程/反应后将变得有活性。在本实施方案中，通过基于N-二(羟乙基)甘氨酸的聚合物体系递送到血流中的治疗或诊断试剂、肽、多肽等，将保持没有活性直至进入或被活性转运到感兴趣的目标细胞中，在那里，其通过细胞内化学，例如通过存在于组织或细胞中的酶或酶体系，而活化。

制备本发明的这个方面的前药以使得所述基于N-二(羟乙基)甘氨酸-聚合物的共轭物的体内水解切断所述共轭物以将所述活性生物材料(本文中命名为A)释放到细胞外液中，同时仍连接于Z或Z′部分。在本发明的该方面中的生物活性材料优选，但不排它地，为小分子治疗剂和/或诊断剂。例如，一个潜在地Z-A组合为亮氨酸-阿霉素，另一个为氨基酸连接的喜树碱或紫杉醇，并且待被治疗的组织为肿瘤组织。

关于本发明如何操作，不意于被任何理论或假设束缚，据信，取决于选择为转运增强剂的另外的部分，生物活性材料转运到肿瘤细胞中的速率为通过生物活性材料以被保护的和/或转运增强的形式递送到细胞外组织空间，例如显示出EPR效应的组织。

在另一个选择中，转运增强剂(Z或Z′)选自用于细胞膜转运体系的已知底物。仅仅举例说明，已知细胞活性转运某些营养物质和内分泌因子等，并且这些营养物质，或其类似物，易于被用于增强生物有效物质活性转运进入目标细胞。这些营养物质的例子包括氨基酸残基、肽，例如大小为约2至约10或更多个残基的短肽、简单的糖和脂肪酸、内分泌因子等。

短肽为，例如，如前所述的范围为2至约10或更多个氨基酸残基的肽。在本发明的实施方案中，据信这些肽转运增强剂不需要是疏水的，而是被认为以其它途径起作用以增强吸收和/或保护所连接的小分子试剂，使其不会在通常的血流中过早水解。例如，肽转运增强剂，如聚精氨酸和其它类似分子量范围的转运增强剂，被认为立体阻碍了通过基于血浆的水解酶切断生物活性试剂，但然后在目标细胞内被多种肽和/或蛋白酶，例如组织蛋白酶切断。

在某些优选的方面中，Z和Z′为疏水性部分。关于疏水性如何贡献于效力，不意于限制于任何理论和假说，据信疏水部分通过抑制存在于细胞外组织空间，例如在血浆中的水解酶等的攻击而抑制了从所述活性生物试剂上细胞外切离所述转运增强剂。因此，一些优选的转运增强剂包括例如如上所述的疏水氨基酸，如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸，以及非天然存在的衍生物，如，Γ-氨基酸及其类似物，如上文所述。

在另一选择中，所述转运增强剂为疏水有机部分。仅仅举例说明，所述有机部分为取代或未取代的C6-18或更大的烷基、芳基或杂芳基。所述有机部分转运增强剂还预计包含和包括有机官能团，该有机官能团包括例如-C(=S)和/或-C(=O)。

E.式(I)A、A′和D基团1.离去或活化基团在其中A和A′未离去或活化基团的那些方面，合适的部分包括但不限于，例如N-羟基苯并三唑基、卤素、N-羟基邻苯二甲酰亚胺基、对硝基苯氧基、咪唑基、N-羟基琥珀酰亚胺基的基团;噻唑烷基硫酮、O-酰基脲、五氟苯氧基、2，4，6-三氯苯氧基或其它合适的对于本领域普通技术人员显而易见的离去基团。

为了本发明的目的，离去基团应被理解为能够与亲核体反应的那些基团，其中所述亲核体可在需要的目标上发现，即在生物活性部分、诊断试剂、靶向部分、双官能间隔部分、中间体等。所述目标因此包含用于置换的基团，例如发现于蛋白质、肽、酶、天然或化学合成的治疗分子如阿霉素、间隔部分如单保护的二胺上发现的NH2基团。

如果需要，本发明的化合物还可以包括在N-二(羟乙基)甘氨酸基团和离去基团或连接的目标(药物)之间的间隔基团。所述间隔部分可以是包含高达18个碳原子和甚至另外的聚合物链的杂烷基、烷氧基、烷基。所述间隔部分可利用标准合成技术加入。应当理解，那些选择用于A和A′的部分还可与除了生物活性亲核体外的其它部分反应。

2.官能团A和A′还可以是官能团。这些官能团的非限制的例子包括马来酰亚胺基、乙烯基、砜的残基、羟基、氨基、羧基、巯基、酰肼、肼基甲酸酯等，它们通过包含胺的间隔部分连接于N-二(羟乙基)甘氨酸部分。一旦连接于所述N-二(羟乙基)甘氨酸部分，所述官能团(例如马来酰亚胺)，可用于将所述N-二(羟乙基)甘氨酸聚合物连接于目标，如多肽、氨基酸和肽间隔部分等的半胱氨酸残基。

3.生物活性部分在其中A和A′为含有胺和羟基的化合物的残基的式(I)的那些方面。这些合适化合物的非限制性列举包括有机化合物、酶、蛋白质、多肽等的残基。有机化合物包括但不限于，例如包括柔红霉素、阿霉素的蒽环类化合物的部分;对氨基苯胺芥子气、美法仑、Ara-C(胞嘧啶阿拉伯糖苷)和相关抗代谢性药物化合物，例如吉西他宾等。或者，所述部分可以是含胺或含羟基的下列残基心血管剂、抗瘤的试剂例如喜树碱和紫杉醇，抗感染药，抗真菌药如制霉菌素、氟康唑和两性霉素B，抗焦虑剂，胃肠剂，中枢神经系统激活剂，镇痛药，致育剂，避孕剂，抗炎剂，甾族剂，试剂等。

除了上述物质，所述生物活性部分还可以是酶，蛋白质，多肽，单克隆抗体，免疫结合物的残基，例如，SS1P，单链抗原结合蛋白(SCA)，例如，CC49，和其片段也是预计包含在本发明中的。合适的蛋白质包括但不限于，具有至少一个适用于聚合物连接的基团，例如Ε-氨基、胱氨酸酰硫基(Cystinylthio)、N末端氨基的多肽、酶、肽等，包括具有生理或药理活性的材料，以及那些能够催化在有机溶剂中的反应的那些。

感兴趣的蛋白质、多肽和肽包括，但不限于血红蛋白、血清蛋白，例如包括因子VII、VIII和IX的血液因子;免疫球蛋白，细胞因子，例如白介素，即IL-1至IL-13等，Α，Β和Γ干扰素，包括粒细胞集落刺激因子的集落刺激因子，得自血小板的生长因子和磷脂酶活化蛋白质(PLAP)以及胸腺素Α1和肠促胰液肽。具有通常的生物或治疗兴趣的其它蛋白质包括胰岛素，植物蛋白质，例如外源凝集素和蓖麻子白蛋白，肿瘤坏死因子和相关的蛋白质，生长因子例如转化生长因子，例如TGF″Α或TGF$Β和表皮生长因子，激素，生长调节素，红细胞生成素，色素激素，下丘脑释放因子，抗利尿激素，促乳素，绒膜促性腺激素，促卵泡激素，甲状腺促进激素，组织纤溶酶原激活剂，等。感兴趣的免疫球蛋白类包括IgG、IgE、IgM、IgA、IgD及其片段。

一些蛋白质，例如白细胞介素，干扰素和集落刺激因子，通常作为采用重组技术的结果还以非糖基化形式存在。所述非糖基化形式也在本发明的蛋白质中。

感兴趣的酶包括碳水化合物特异性酶，蛋白水解酶，氧化还原酶，转移酶，水解酶，裂解酶，异构酶和连接酶。不限制于特定的酶，感兴趣的酶的例子包括天冬酰胺酶，精氨酸酶，精氨酸脱氨酶，腺苷脱氨酶，超氧化物岐化酶，内毒素酶，过氧化氢酶，糜蛋白酶，脂肪酶，尿酸酶，腺苷二磷酸酶，酪氨酸酶和胆红素氧化酶。感兴趣的碳水化合物特异性酶包括葡萄糖氧化酶，Glucodases，半乳糖苷酶，葡糖脑苷脂酶，Glucouronidases，等。

本文中还包括说明体内生物活性的生物聚合物的任何部分。这包括氨基酸序列，核酸(DNA，RNA)，肽核酸(PNA)，抗体片段，单链结合蛋白，参见，例如美国专利4,946,778，其公开的内容通过引用并入本文中，结合分子包括抗体或片段，多克隆抗体，单克隆坑体和催化抗体的融合。

所述蛋白或其部分可通过使用本领域技术人员已知的技术制备或分离，所述技术为组织培养，从动物来源提取，或通过重组DNA方法。蛋白质，多肽，氨基酸序列等的转基因源也预计落入本发明中。这些材料得自转基因动物，即，小鼠、猪、牛等，其中所述蛋白质在奶、血或组织中表达。转基因昆虫和杆状病毒表达体系也预计用作来源。另外，蛋白质的突变体形式，例如突变的干扰素也落入本发明的范围内。

感兴趣的其它蛋白质为变应源蛋白质，例如豚草，抗原E，蜂毒，螨变应源，等。上述为适合于本发明的蛋白质的例举。应当理解如本文中所定义的，没有明且提及但具有可用的氨基的那些蛋白质，也属于本发明的范围内。

在本发明优选的方面，所述含氨基或羟基的化合物为适用于医学或诊断用于治疗动物的生物活性化合物，所述动物为包括人的哺乳动物，用于需要这种治疗的症状。上述列举意于举例说明而非限制可被修饰的化合物。本领域普通技术人员将意识到其它这样的化合物/组合物可被类似地改性而无需过度的实验。应当理解，没有明确提及但具有适当的结合基团的那些生物活性材料也意于和在本发明的范围内。

对适合于包含于本文中的包含氨基或羟基的分子的类型的唯一的限制是要有至少一个胺(伯胺或仲胺)或羟基，其可与聚合物共轭物反应和连接，并且在所述前药体系释放和再次产生母体化合物后，基本上不会丧失生物活性。

4.烷基在其中A和A′为烷基的式(I)的那些方面，适当的基团的非限制性的列举由C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代环烷基、芳烷基、C1-6杂烷基和取代的C1-6杂烷基组成。

5.诊断试剂在其中A和A′为诊断试剂的式(I)的那些方面，适当的试剂的非限制性列举包括染料，螯合剂，和同位素标记化合物和其它标记化合物，例如绿荧光蛋白(GFP)。

6.靶向部分在其中A和A′为靶向部分的式(I)的那些方面，适当的试剂的非限制性列举包括肽如TAT肽和U-7肽，单链抗体如CC49，和小分子如牛磺酸和生物素。

F.N-二(羟乙基)甘氨酸连接的聚合物的合成具体的基于N-二(羟乙基)甘氨酸的聚合物的化合物的合成在实施例中阐明。为了说明的目的，现在转向图1，一个优选的方法包括1)将约一当量的扩展封闭的双官能接头，例如， 与约一当量的酸保护的N-二(羟乙基)甘氨酸部分(在图1中确定为1)反应以形成中间体，例如 其中TBu为保护基团;2)将步骤1)的中间体与酰化试剂，例如乙酰氯反应以形成中间体，例如，

3)将形成的上述中间体解除封闭，并使其与活化的聚合物，例如PNP-PEG和SC-PEG在碱性偶合条件下反应，4)将所述N-二(羟乙基)甘氨酸脱保护，并在之后将该酸用适当的活化基团，例如噻唑烷基硫酮或N-羟基琥珀酰亚胺，在偶合条件下活化。

用于制备所述N-二(羟乙基)甘氨酸衍生物的另选的方法包括1)将一当量的扩展封闭的双官能接头与一当量的酸保护的N-二(羟乙基)甘氨酸部分反应以形成中间体，例如 其中TBu为保护基团;2)将得自步骤1)的中间体与适当改性的活化基团，例如 反应以形成中间体，例如

3)将形成的上述中间体解除封闭，并使其与活化的聚合物，例如PNP-PEG和SC-PEG在碱性偶合条件下反应，和4)将所述N-二(羟乙基)甘氨酸脱保护，并在之后用适当的活化基团，例如噻唑烷基硫酮和N-羟基琥珀酰亚胺，在偶合条件下活化。

应当理解的是，其它的本领域公认的保护基团可用于替代T-Bu。现在，活化的PEG或聚合物N-二(羟乙基)甘氨酸衍生物能够与药物、肽、间隔部分反应和与之结合。

适当的偶联剂的非限制性的列举包括1，3-二异丙基-碳二亚胺(DIPC)，任何合适的二烷基碳二亚胺，2-卤代-1-烷基吡啶鎓卤化物(Mukaiyama试剂)，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)，丙烷膦酸环状酸酐(PPACA)和二氯磷酸苯酯等。它们可商购于例如Sigma-Aldrich Chemical，或利用已知的技术合成。

优选地，所述取代基在惰性溶剂中反应，所述惰性溶剂例如四氢呋喃(THF)、乙腈(CH3CN)、二氯甲烷(DCM)、氯仿(CHCl3)、二甲基甲酰胺(DMF)或其混合物。合适的碱包括二甲基氨基吡啶(DMAP)，二异丙基乙胺、吡啶、三乙胺、KOH、叔丁醇钾和NaOH等。所述反应通常在约0℃直至约22℃(室温)的温度下进行。

无论所选择的途径如何，由本文中所述的合成技术形成的一些优选的化合物包括

其中A1为例如以下的

的基团或其它离去基团或活化基团，例如如上所述的那些。

所述N-二(羟乙基)甘氨酸活化的聚合物与适当的目标反应，导致该活性聚合物转化成共轭物，将A1转化为A2，其中A2为生物活性部分、间隔部分等的残基。

由如上本文中描述的技术导致的优选化合物的非限制性列举为

其中

G.多个聚合物的负载在本发明的又一个方面中，提供基于N-二(羟乙基)甘氨酸的多支化的聚合物化合物。具体而言，所述碱性N-二(羟乙基)甘氨酸衍生物被进一步改性以包括一个或多个末端支化基团。优选地，所述末端支化基团为下式 其中Y6和Y7独立地为O、S或NR46;L6为选自与L1相同定义的双官能接头;L8为选自与L2相同定义的双官能接头;R40-R46可以相同或不同，并选自氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-19支链烷基、C3-8环烷基、C1-6取代烷基、C2-6取代烯基、C2-6取代炔基、C3-8取代环烷基、芳基、取代芳基、芳烷基、C1-6杂烷基、取代的C1-6杂烷基、C1-6烷氧基、苯氧基和C1-6杂烷氧基;J、J′、I和I′各自独立地为0或正整数;L和L′独立地为0或1;U、R、V和W为独立选择的正整数;R50选自基本上非抗原性的聚合物残基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳烷基，和

其中L7为选自与L1相同定义的双官能接头;L9为选自与L2相同定义的双官能接头;R60选自基本上非抗原性的聚合物残基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳烷基，并且所有其它的变量为如上所定义的。

所形成的支化N-二(羟乙基)甘氨酸衍生物为下式结构

其中所有变量为如上所定义的。

如上和在实施例中所述的，利用本发明的方法所形成的N-二(羟乙基)甘氨酸聚合物体系提供用于多重负载生物活性部分或其它A基团的能力。本发明的该支化的N-二(羟乙基)甘氨酸体系的优点为本领域技术人员可采用线性高分子量聚合物和另外，以根据本领域技术人员的需要连接一个或多个生物活性部分、诊断试剂或靶向试剂的多种组合。

H.体内诊断本发明的另一个方面提供本发明的共轭物，其任选用连接于如上所述的转运增强剂的诊断标记制备，其中该标记被选择以用于诊断或成像目的。因此，通过将任何合适的部分，例如氨基酸残基，连接于任何本领域标准的放射性同位素、辐射透不过的标记物、磁共振标记物或其它适合于磁共振成象的非辐射活性的同位素标记物，荧光型标记物，显示出可见色彩和/或能够在紫外、红外或电化学刺激下发出荧光的标记物，以使得肿瘤组织在外科过程中成像，等。任选地，将所述诊断标记并入到和/或连接于结合的治疗部分中，使得可以监控在动物或人类患者中的治疗性生物活性材料的分布。

在本发明的又一个方面，本发明的附属的共轭物通过已知的方法，利用任何适合的标记物，包括例如放射性同位素标记物而容易地制备。仅仅举例说明，这些包括131碘、125碘、99m锝和/或111铟以产生用于在体内选择性吸收进入肿瘤细胞的放射免疫闪烁显像试剂。例如，有很多本领域已知的将肽连接于Tc-99m的方法，其包括仅仅举例说明，美国专利5,328,679、5,888,474、5,997,844和5,997,845中说明的那些，这些文献通过引用并入本文中。

广泛地，为了在解剖学上定位在患者中的肿瘤组织，将所述结合的附属物给药到怀疑具有肿瘤的患者或动物中。在充足的时间使标记的免疫球蛋白在一个或多个肿瘤位点处定位后，通过X-射线照相术，计算机化横面X线断层摄影术，MRI，通过荧光标记的仪器检测，通过照片扫描装置，例如Γ照相机，或适用于所选择的标记的性质的其它方法或仪器而例如，可见地检测由标记物产生的信号。

然后将所检测的信号转化成图象或肿瘤位置的解剖学和/或生理学确定。该图象使得其可能在体内定位所述肿瘤并设计出合适的治疗方案。在其中标记的部分自身就是治疗剂的那些实施方案中，所检测的信号在治疗过程中提供解剖学定位的证据，提供用于随访诊断和治疗干预的基准。

I.治疗方法本发明的另一个方面提供在哺乳动物中对于多种医学状况的治疗方法。所述方法包括向需要这种治疗的哺乳动物给药有效量的前药，例如阿霉素-N-二(羟乙基)甘氨酸结合的PEG共轭物，其已经如本文所述的那样被制备。所述组合物尤其用于在哺乳动物中治疗瘤性疾病，降低肿瘤负担，防止肿瘤转移和防止肿瘤/瘤生长的复发。

所给药的前药的量取决于包括于其中的母体分子，例如肽，多肽，蛋白质，酶等。通常，用于所述治疗方法的前药的量为在哺乳动物中有效获得希望的治疗结果的量。自然地，不同前药化合物的剂量将取决于所述母体化合物、体内水解的速率、所述聚合物的分子量等而在一定程度上变化。本领域技术人员将确定基于临床经验和治疗适应症而选择的前药的最佳剂量。实际的剂量对于本领域技术人员而言将是显而易见的而无需过度的实验。

本发明的组合物可被包括于一个或多个适合用于向哺乳动物给药的药物组合物中。所述药物组合物可以是溶液、悬浮液、片剂、胶囊等的形式，其根据本领域公知的方法制备。还预计这些组合物的给药可以通过口服和/或非肠道途径，这取决于本领域技术人员的需要。所述组合物的溶液和/或悬浮液可用作例如用于通过任何本领域已知的方法注射或渗透所述组合物的载体媒介物，所述方法例如通过静脉内、肌内、皮下注射等。

这种给药还可通过灌注进入身体空间或腔，以及通过吸入和/或鼻内途径。然而，在本发明优选的方面中，将所述前药非经肠道地给药到需要其的哺乳动物中。

实施例如下实施例提供本发明的进一步说明，但不意于以任何方式限制本发明的有效范围。在实施例中的下划线和粗体数字对应于示于图1至5中的那些。

化学通用步骤。所有的反应在干燥氮气或氩气的气氛下进行。使用市售的试剂而不用进一步纯化。将所有的PEG化合物在使用前在真空下干燥或通过从甲苯中共沸蒸馏而干燥。NMR光谱，除非另外说明，是利用Varian Mercury300 NMR光谱仪和氘代氯仿作为溶剂而获得的。化学位移(Δ)以从四甲基硅烷(TMS)的低磁场的百万比率(Ppm)报告。

HPLC法。反应混合物，以及中间体和终产物的纯度通过BeckmanCoulter System GoldHPLC仪器进行监控，所述仪器采用ZOBAX300SB C-8反相柱(150×4.6mm)或Phenomenex Jupiter300A C18反相柱(150×4.6mm)，采用多波长UV检测器，采用在0.5%三氟乙酸(TFA)中的30-90%乙腈的梯度，流速为1mL/Min。

实施例1化合物3的合成将2(2.3g，8.7mmol)、1(1.9g，8.8mmol)和DMAP(1.6g，12.9mmol)的30ml无水二氯甲烷的溶液在冰浴中冷却至0℃，随后加入EDC的盐酸盐(2.3g，12.0mmol)。将该混合物温热至室温过夜，随后用0.1N的HCl洗涤。将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并将溶剂通过旋转蒸发从滤液中除去以生成3(3.6g，7.8mmol，90%)。13CNMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.04，169.86，155.54，80.87，78.66，70.49，69.95，68.14，62.71，55.85，52.59，40.02，28.15，27.91。

实施例2化合物4的合成向3(1.8g，3.9mmol)的35ml无水二氯甲烷溶液中加入乙酰氯(0.49g，6.2mmol)，随后加入二异丙基乙基胺(1.82g，14mmol)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，此时通过TLC检测不到原料。将该混合物用饱和碳酸氢钠洗涤并经无水硫酸钠干燥，过滤，并将溶剂通过旋转蒸发从滤液中除去以生成1.6g的粗产物。将该材料通过在硅胶上的柱色谱法纯化，并用2.5%乙腈的乙酸乙酯洗脱以生成4(0.69g，1.4mmol，35%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.60，170.27，170.02，155.68，80.99，78.88，70.68，70.13，70.10，68.34，62.93，62.74，56.11，52.81，52.76，40.21，28.29，28.08，20.88。

实施例3化合物7的合成将在20ml二氯甲烷和5ml的TFA中的4(0.25g，0.50mmol)的溶液在室温下搅拌15分钟，随后通过旋转蒸发从滤液中除去溶剂以生成5。将化合物5与10ml无水二氯甲烷合并，随后加入DIEA直至PH大于8.0(～0.2g)。将该N-二(羟乙基)甘氨酸溶液加入到6(5.0g，0.12mmol)的40ml无水二氯甲烷溶液中，并在室温下搅拌过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，用醚沉淀产物，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从12%DMF/IPA中重结晶以生成7(4.6g，0.11mmol，90%)。

13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.31，170.03，169.76，155.91，80.74，70.64-70.19(PEG)，69.78，69.72，69.23，68.13，63.52，62.73，62.53，55.92，52.64，40.46，27.91，20.69.

实施例4化合物8的合成将在50ml二氯甲烷和25ml的TFA中的7(4.8g，0.12mmol)的溶液在室温下搅拌7小时，随后通过旋转蒸发将溶剂部分除去，并用醚使产物沉淀。通过过滤收集固体，并用醚洗涤数次并干燥以生成8(4.1g，0.10mmol，85%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ171.15，170.25，169.71，155.96，70.19-69.77(PEG)，69.22，69.16，63.51，62.29，61.94，55.77，53.11，53.01，40.44，20.60。

实施例5化合物9的合成将8(4.0g，0.1mmol)，2-巯基噻唑啉(70mg，0.59mmol)和DMAP(0.1g，0.79mmol)的40ml无水二氯甲烷的溶液在冰浴中冷却至0℃，随后加入EDC的盐酸盐(0.11g，0.59mmol)。将该混合物温热至室温过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将粗产物从12%DMF/IPA中重结晶以生成9(3.7g，0.09mmol，93%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ200.96，172.78，170.35，169.80，155.93，70.70-70.21(PEG)，69.81，69.75，69.25，68.13，63.57，63.03，62.77，60.64，55.34，52.64，40.49，28.80，20.72。

实施例6化合物10的合成将在30ml二氯甲烷和30ml DMF的9(3.0g，0.073mmol)，阿霉素(0.17g，0.29mmol)和DMAP(71mg，0.59mmol)的溶液在室温下搅拌过夜。此时通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将粗产物从DMF/IPA中重结晶三次以生成10(2.9g，0.069mmol，94%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ211.24，186.23，185.89，170.47，169.82，169.04，161.81，160.34，155.78，155.14，135.20，134.79，133.84，133.58，120.16，119.13，118.01，110.76，110.60，100.34，72.19-67.95(PEG)，66.87，63.31，61.75，61.45，58.97，56.21，53.83，44.44，40.29，36.03，34.67，32.83，30.97，29.38，24.97，24.45，20.54，16.46。

实施例7化合物13的合成将12(2.5g，10.1mmol)，二乙醇酸酐11(1.1g，9.5mmol)和DMAP(1.3g，9.5mmol)的25ml二氯甲烷溶液在室温下搅拌过夜，随后用0.2N HCl洗涤。将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并通过旋转蒸发将溶剂从滤液中除去以生成13(2.9g，8.0mmol，84%)。Nmr显示峰成双。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ172.92，171.14，169.92，169.58，157.50，155.79，80.86，79.03，71.34，70.69，70.19，70.06，69.84，69.64，69.33，69.15，68.85，68.40，53.29，41.37，36.97，38.75，38.55，28.10。

实施例8化合物14的合成将13(2.8g，7.7mmol)，1(1.7g，7.7mmol)和DMAP(1.3g，10.8mmol)的30ml无水二氯甲烷溶液在冰浴中冷却至0℃，随后加入EDC盐酸盐1.9g(10.0mmol)。将该混合物温热至室温过夜，随后用0.2NHCl洗涤。将该有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并通过旋转蒸发将溶剂从滤液中除去以生成14(2.3g，4.1mmol，53%)。

实施例9

化合物15的合成向粗制14(2.3g，4.1mmol)的20ml无水二氯甲烷溶液中加入乙酰氯(0.64g，8.2mmol)，随后加入二异丙基乙基胺(1.1g，8.2mmol)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，此时通过TLC检测不到原料。将该混合物用饱和碳酸氢钠洗涤并经无水硫酸钠干燥，过滤并通过旋转蒸发将溶剂从滤液中除去以生成2.1g粗产物。该物质通过在硅胶上的柱色谱纯化并用5%的甲醇的乙酸乙酯洗脱以生成(0.24g，0.40mmol，10%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.33，170.02，169.17，168.44，155.47，80.78，78.64，70.64，69.81，69.26，68.07，63.01，62.48，55.92，52.57，40.00，38.31，28.10，27.87，20.65。

将乙酰化的产物(0.23g，0.38mmol)在20ml二氯甲烷和5ml TFA的溶液中搅拌，随后通过旋转蒸发除去溶剂。将该N-二(羟乙基)甘氨酸残留物与10ml无水二氯甲烷合并，随后加入DIEA直至PH大于8.0(～0.2g)。将该N-二(羟乙基)甘氨酸加入到6(4.0g，0.10mmol)的30ml无水二氯甲烷溶液中，并在室温下搅拌过夜。此时，将溶剂通过旋转蒸发部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从12%DMF/IPA中重结晶以生成(3.8g，0.02mmol，95%)。

13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.29，169.97，169.13，168.37，155.90，80.80，70.68-69.67(PEG)，69.20，68.09，63.52，63.02，62.47，55.94，52.59，40.49，38.31，27.91，20.69.

将该PEG化的产物(3.8g，0.10mmol)的40ml二氯甲烷和20mlTFA的溶液在室温下搅拌15小时，随后通过旋转蒸发将溶剂部分除去，用醚将产物沉淀。固体通过过滤收集，并用醚洗涤数次并干燥以生成酸(3.4g，0.08mmol，89%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.96，169.93，168.89，168.23，155.78，72.45-66.94(PEG)，63.23，62.38，61.63，54.82，52.47，40.23，38.03，20.39。

将该酸(3.4g，0.08mmole)、2-巯基噻唑啉(59mg，0.50mmol)和DMAP(81mg，0.66mmol)的40ml无水二氯甲烷溶液在冰浴中冷却至0℃，随后加入EDC的盐酸盐(0.11g，0.59mmol)。将该混合物温热至室温过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将该产物用醚过滤，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从20%DMF/IPA中重结晶以生成15(3.2g，0.078mmol，94%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ200.96，172.64，170.28，168.13，168.34，155.85，75.76-69.15(PEG)，68.07，63.48，63.20，62.62，60.56，55.31，52.53，40.44，38.26，28.74，20.66.

实施例10化合物16的合成将15(3.2g，0.0783mmol)，阿霉素(0.18g，0.319mmol)和DMAP(77mg，0.62mmol)的30ml二氯甲烷和30ml DMF的溶液在室温下搅拌过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从20%DMF/IPA中重结晶四次以生成16(2.8g，0.067mmol，88%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ212.98，186.21，185.86，170.34，169.33，168.98，168.29，160.32，155.79，155.58，154.94，135.22，134.70，133.23，133.05，120.09，119.14，118.03，110.79，110.61，100.29，75.90-68.44(PEG)，67.80，66.91，64.90，63.31，62.06，61.36，58.79，56.18，53.86，53.60，44.37，40.26，38.12，35.25，33.27，29.33，20.47，16.48。

实施例11化合物17的合成在室温下向12(1.0g，4.0mmol)的20ml二氯甲烷溶液中加入三氟生(0.4g，1.3mmol)，和二异丙基乙基胺(1.0g，8.1mmol)。将该混合物在室温下搅拌一小时，随后加入1(0.88g，4.0mmol)和DMAP(0.5g，4.0mmol)。将该混合物在室温下搅拌过夜，随后用0.1N HCl洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并将溶剂通过旋转蒸发从滤液中除去以生成2.2g粗产物。将该物质通过在硅胶上的柱色谱纯化并用6%的甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱以生成17(1.3g，2.6mmol，65%)。

13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.86，156.23，155.69，81.10，78.94，62.60，59.03，56.81，56.09，53.17，40.68，40.18，28.28，28.00。

实施例12化合物18的合成向17(0.1g，0.2mmol)的2ml无水二氯甲烷溶液中加入乙酰氯(32mg，0.4mmol)，随后加入二异丙基乙基胺(87mg，0.67mmol)。将该混合物在室温下搅拌10分钟，此时通过TLC检测不到原料。将该混合物用饱和碳酸氢钠洗涤并经无水硫酸钠干燥，过滤，并通过旋转蒸发将溶剂从滤液中除去以生成18(0.1g，0.2mmol，100%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.59，170.33，156.16，155.64，80.99，79.13，70.21，70.05，63.08，62.97，56.48，53.46，52.92，40.87，40.39，28.49，28.27，21.04，20.69。

实施例13化合物20的合成将18(0.1g，0.2mmol)的8ml二氯甲烷和2ml TFA溶液搅拌15分钟，随后通过旋转蒸发将溶剂除去。将N-二(羟乙基)甘氨酸残余物与5ml无水二氯甲烷合并，随后加入DMAP直至PH超过8.0(～0.6g)。将该N-二(羟乙基)甘氨酸溶液加入到19(2.0g，0.05mmol)的15ml无水二氯甲烷溶液中，并在室温下搅拌过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从12%DMF/IPA中重结晶以生成20(1.8g，0.04mmol，90%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.50，170.18，156.40，156.37，156.08，155.32，80.74，71.57-65.23(PEG)，63.72，63.29，62.62，58.68，56.10，53.13，52.53，40.93，40.51，27.94，20.74。

实施例14化合物21的合成将20(1.8g，0.04mmol)的20ml二氯甲烷和10ml TFA的溶液在室温下搅拌7小时，随后通过旋转蒸发将溶剂部分除去，并用醚将产品沉淀。通过过滤收集固体，并用醚洗涤数次并干燥以生成(1.4g，0.03mmol，78%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ172.11，170.34，156.39，156.16，155.41，72.80-67.82(PEG)，63.75，63.35，62.30，61.89，58.71，56.15，53.66，53.25，40.93，40.55，20.65。

将该酸(1.2g，0.03mmol)，2-巯基噻唑啉(0.01g，0.09mmol)和DMAP(0.014g，0.12mmol)的10ml无水二氯甲烷溶液在冰浴中冷却至0℃，随后加入EDC的盐酸盐(0.017g，0.09mmol)。将该混合物温热至室温过夜。此时，将溶剂通过旋转蒸发部分除去，将该产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从12%DMF/IPA中重结晶以生成21(1.1g，0.03mmol，92%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.76，170.46，156.33，155.99，155.30，71.54-69.12(PEG)，63.69，63.32，62.84，62.62，60.70，58.67，55.36，53.05，52.49，40.92，40.49，28.78，20.71。

实施例15化合物22的合成将21(1.0g，0.025mmol)，阿霉素(28mg，0.05mmol)和DMAP(12mg，0.1mmol)的10ml二氯甲烷和10ml DMF的溶液在室温下搅拌过夜。此时，将溶剂通过旋转蒸发部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产品从12%DMF/IPA中重结晶以生成22(0.6g，0.015mmol，60%)。

实施例16化合物24的合成将23(23g，0.575mmol)和二琥珀酰亚胺基碳酸酯(2.36g，9.2mmol)的230ml二氯甲烷和23ml DMF的溶液冷却至0℃，随后加入吡啶(0.75ml，9.2mmol)。将该混合物温热至室温过夜，随后通过Celite过滤并通过旋转蒸发器将溶剂从滤液中部分除去。将粗产物用醚沉淀出来并通过过滤收集。从20%DMF/IPA中重结晶，获得24(20.1g，0.50mmol，86%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ168.15，151.14，70.76-69.67(PEG)，67.99，45.24，25.20。

实施例17化合物25的合成将18(0.51g，0.9mmol)的溶液与10ml无水二氯甲烷合并，随后加入DIEA直至PH超过8.0(～0.6g)。将该N-二(羟乙基)甘氨酸溶液加入到24(5.0g，0.12mmol)的40ml无水二氯甲烷溶液中，并在室温下搅拌过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将该产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从12%DMF/IPA中重结晶以生成25(4.9g，0.12mmol，94%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.38，170.12，155.90(D)，80.65，72.16-69.20(PEG)，63.51，62.79，62.62，61.28，56.12，53.10，52.53，45.19，40.46，27.91，20.72。

实施例18化合物26的合成将25(5.5g，0.13mmol)的55ml二氯甲烷和28ml TFA的溶液在室温下搅拌7小时，随后通过旋转蒸发部分除去，并用醚将产物沉淀。通过过滤收集固体，并用醚洗涤数次并干燥以获得酸(5.1g，0.12mmol，93%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ170.49，170.20，156.01，155.68，70.70-69.22(PEG)，67.80，66.68，63.54，62.64，61.65，61.22，55.45，53.57，53.17，45.21，40.52，20.56。

将该酸(5.0g，0.12mmol)，2-巯基噻唑啉(0.17g，1.4mmol)和DMAP(0.23g，1.9mmol)的50ml无水二氯甲烷溶液在冰浴中冷却至0℃，随后加入EDC盐酸盐(0.28g，1.5mmol)。将该混合物温热至室温过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从12%DMF/IPA中重结晶以获得26(4.6g，0.11mmol，92%)。13C NMR(75.4MHz，CDCl3)Δ200.88，172.83，170.38，155.91，72.15-69.20(PEG)，63.51，63.03，62.82，62.62，61.26，60.70，55.34，53.07，52.52，45.19，40.47，28.78，20.71。

实施例19化合物27的合成将26(2.3g，0.055mmol)，阿霉素(0.25g，0.44mmol)和DMAP(0.11g，0.88mmol)的20ml二氯甲烷和20ml DMF溶液在室温下搅拌过夜。此时，通过旋转蒸发将溶剂部分除去，将产物用醚沉淀，并收集并用醚洗涤。将该粗产物从12%DMF/IPA中重结晶两次以获得27(1.7g，0.039mmol，71%)。

实施例20单N-二(羟乙基)甘氨酸-12K-溶菌酶和单N-二(羟乙基)甘氨酸-20K-溶菌酶共轭物的制备在快速搅拌下，将PEG粉末，以PEG对蛋白质为1∶1.5-2的反应摩尔比下加入到6ml在0.05M，PH为7.6的磷酸钠溶液中的5mg/Ml溶菌酶(Sigma，MO)中。60分钟后，在反应温度为25℃和在N2下，将样品用10mM PH为5.1的磷酸钠溶液稀释至导电性低于2ms，PH～5(较低的PH将淬灭反应并稳定可释放的PEG-蛋白质共轭物)。

将单PEG-溶菌酶在阳离子交换柱(Poros HS，Applied Biosystems，CA)上利用20mM PH为5.1的磷酸钠溶液体系和1M NaCl的20mMpH为5.1磷酸钠梯度缓冲液进行分离。从所述柱子上洗脱的化合物的顺序显示为首先多PEG-溶菌酶，然后单PEG-溶菌酶，并且然后是未改变的溶菌酶。在SDS-PAGE(预制的4-20%SDS非还原胶，Invitrogen，CA)上识别的单PEG-溶菌酶的峰利用具有5k NMWL膜(MilliporeCorp.，Bedford，MA)的Ultrafree离心过滤器采集和浓缩。

实施例21多N-二(羟乙基)甘氨酸-12K-溶菌酶和多N-二(羟乙基)甘氨酸-20K-溶菌酶共轭物的制备在快速搅拌下，将PEG粉末，以PEG对蛋白质为1∶20-30的反应摩尔比下加入到0.5ml在0.1M，PH为7.6的磷酸钠溶液中的5mg/Ml溶菌酶中。在室温下，在N2下，反应进行60分钟并通过将PH降低至6.0而停止，或立即在体积排阻柱上纯化。

将反应混合物用20mM PH为6.0的磷酸钠稀释至5ml，通过0.45μm过滤器过滤，并在HiLoad Superdex 200柱(Amersham，NJ)上分离。将该柱子在140mM NaCl，20mM NaP，PH 6.0中平衡并将所述共轭物在1ml/流分/分钟下洗脱出。将在SDS-PAGE上识别的峰的级分收集起来并利用Ultrafree 30K(Millipore Corp.，Bedford，MA)浓缩。

实施例22体外结果表1.PEG-N-二(羟乙基)甘氨酸-阿霉素共轭物的性质

实施例23蛋白质共轭物材料和方法鸡蛋清溶菌酶(EC 3.2.1.17)，溶菌酶底物细菌(溶壁微球菌(Micrococcus Lysodeikticus))和PBS缓冲液(10mM磷酸盐，PH 7.4，138mM NaCl，和2.7mM KCl)购自Sigma Inc.(St.Louis，MO)。预制的Tris甘氨酸SDS电泳凝胶和凝胶电泳运行缓冲液(Gel Runningbuffer)得自Invitrogen(Carlsbad，CA)。用于测量体外共轭物水解的大鼠血浆在EDTA中进行并冷冻保存。IL-2购自PeproTech(Princeton，NJ)，并且GFP得自Clontech(Palo Alto，CA)。所有体内的测量一式三份地进行，并且对于体外测量发现±5%的标准偏差。

单PEG-溶菌酶共轭物的制备得自鸡蛋的溶菌酶具有14,500的分子量和6个赖氨酸残基。在快速搅拌下，将活化的PEG粉末，以1∶1(PEG∶溶菌酶)的反应摩尔比加入到在PH为7.3的0.1M磷酸缓冲液中的5mg/ML的溶菌酶溶液中。在25℃下搅拌45分钟后，将反应用0.2M磷酸钠(PH 5.1)处理至终PH为6.5。利用截留范围6,000-8,000MW滤过膜(Cutoff Membrane)在4℃下在PH 5.1的20mM磷酸钠中透析反应混合物。透析后所述样品的导电性应当小于2mS。在阳离子交换柱(Poros，HS)上利用具有NaCl梯度的PH为5.1的20mM磷酸钠的溶剂体系进行单PEG-溶菌酶的分离。采集单PEG-溶菌酶的峰并利用具有10k NMWL膜(MilliporeCorp.，Bedford，MA)的Ultrafree离心过滤器装置浓缩。纯化的单PEG-溶菌酶的收率为约20-30%。

多PEG-溶菌酶共轭物的制备在快速搅拌下，将活化的PEG接头，以30∶1(PEG∶溶菌酶)的反应摩尔比加入到在PH为7.3的0.1M磷酸缓冲液中的5mg/ML的溶菌酶溶液中。在室温下搅拌45分钟后，将反应用0.2mM磷酸钠(PH 5.1)处理至最终PH为6.5。将反应混合物用H2O稀释并在Hiload Superdex200柱上在1mL/Min下分离。该柱子缓冲液包含20mM磷酸钠(PH 6.8)和140mM NaCl。将所述峰的级分收集起来并利用具有30k NMWL膜(Millipore Corp.，Bedford，MA)的Ultrafree离心过滤器装置浓缩。纯化的多PEG-溶菌酶的收率为约85%，并且每个溶菌酶分子的PEG数量如通过荧光含量测定所分析的那样发现为5-6。

浓度确定在0.1M，PH为7.3的磷酸钠中，通过UV利用在280nm处2.39mL/Mg.Cm的消光系数确定PEG-溶菌酶共轭物的浓度。

溶菌酶的酶活性分析在如上所述的反应条件下，在仅与单个PEG结合后，溶菌酶活性消失。所述溶菌酶的释放通过在多种释放条件下酶活性的产生表明并在SDS电泳凝胶上证实。

在典型的溶菌酶活性分析中，在96孔滴定板中，将0.2mL的0.02%(W/V)M.Lysode

简要回答

人们想要有效的减去肚皮的脂肪，最有效的方法就是长期坚持跑步，毕竟跑步属于有氧运动，在跑步的过程中不仅仅能够让肚子处于收缩的状态，而且还可以有效的减少腹部赘肉的形成。只是大众在选择跑步时要做好热身运动。

有些小伙伴选择跑步来达到了不错的功效，但是在跑步之前并没有做热身运动，从而出现肌肉拉伤的情况，另外想要有效消除肚皮脂肪也可以采用跳绳的方式，一般每天跳500下。

如果肚皮的脂肪特别的厚，个人觉得应该直接做仰卧起坐，在做仰卧起坐时需要采用合适的方法，比如让身体处于仰卧的状态，并且两条腿要合在一起，双手直接向上面去。

对于部分小伙伴来说，他们在生活中挑选做仰卧起坐时，可能起初一分钟只能做5~6次，不过随着时间的推移，我们会发现做仰卧起坐的次数会不断的增加。

人们在生活中除了长期坚持运动以外，而还需要合理的搭配饮食，不要吃过于油腻的食物，更加不要暴饮暴食。

束腰带是很多女生维持身材必不可少的一个辅助，它对于我们腰部的塑形效果非常的好，长期穿的话对于脂肪来说是可以达到转移的目的的。

束腰会让脂肪转移吗

会转移，但是不会减掉身体的脂肪，脂肪含量是不变的。

束腰的直接后果就是脂肪引流。也就是把脂肪挤到别的地方去了从而达到束腰效果。皮下脂肪内脏脂肪。这两个通过束腰都不能减少，但是束腰能把脂肪向上下推，包括腹内脏器，长期束腰最后是能看到腰部凹痕的。不过束腰不能改变脂肪含量，而脏器移位影响它们的蠕动，可能得病，比如便秘，肠粘连等，局部血液循环也不好。

束腰能瘦腰吗

不运动不控制饮食的话，腰是不会瘦的。穿戴束腰治标不治本，在穿着的时候，你会感觉到挺胸收腹，但是脱下来的时候就会分分钟打回原形。

会妨碍腹腔脏器的血液循环，影响胃肠蠕动，降低消化和呼吸功能，容易导致便秘，诱发痔疮、肛裂等疾病。还会影响盆腔的血液循环，容易引起盆腔充血，影响正常月经。所以健康减肥才是最重要的。

束腰的危害

(1)影响呼吸。《加勒比海盗》中伊丽莎白说“我不能呼吸了”，不是因为紧张，而是束腰太紧，横膈膜不能移动，肺部也就无法吸入新鲜空气，那么束腰的人就接近窒息了，怎么能不难受?你就想象一下晕车+溺水的感觉。

(2)内脏压迫。人的器官是有固定位置的，如果腹腔空间足够，当然没有问题，但是束腰会减少腹腔空间，那么器官就像被拍扁的袋子里的面包，挤在一起，你说难受不难受?极端的束腰，比如《乱世佳人》里斯嘉丽的16英寸(40.6cm)，对于天生纤细的斯嘉丽来说都是“只能吃得下一小匙(冰淇淋)”，对于骨架大的女子而言，内脏挤爆也不是开玩笑的。严歌苓有一篇小说里提及乡村戏班，调侃地说“如果把(束腰)这份力道用在脖子上，那脖子一定一声不吭地就断了气”，可见束腰的残酷。

怎样可以瘦腰

1、晚餐要清淡，饭后小运动

同样地晚餐要尽量少吃，而且吃得清淡。还是晚饭后半个小时，可以做做运动，夹紧臀部，把整个背部紧贴在墙壁上，臀部、背部、腿部、腰部、头、脖子等都尽量贴紧墙面。几分钟后腰就会很很累，坚持15分钟。每天都做一次，一周就开始见到效果，不仅能瘦腰，而且腿部、脖子、脸部也能变瘦。

2、左右扭腰瘦肚子

可以是中午或者是晚上练习。站立左右扭腰100下(类似肚皮舞的扭腰动作，要借助腰部用力，而不是腿部或者是背部力量)，只要每天都坚持，保证有效!

3、饭后靠墙站

进过晚餐半个小时之后，找以免干净的墙面，将自己整个后背靠在墙上，同时将自己的臀部夹紧，尽量让身体后部所有都靠紧墙面。这样的动作只要几分钟就能够让你觉得很劳累，肌肉发酸，但是一定要坚持，每天做不少于十五分钟。这个方法不仅能瘦腰瘦肚子，连大腿、脖子还有脸都能变瘦呢!

玻尿酸作为人体皮肤组织成分的一部分，常常被用来作为隆鼻术的材料。玻尿酸隆鼻就是现在求美者经常使用的一种隆鼻方式。下面就来介绍下玻尿酸隆鼻和自体脂肪隆鼻哪个好。

变美方案

玻尿酸隆鼻和自体脂肪隆鼻哪个好两种隆鼻方法效果都很好，各有千秋，建议去医院检查一下，咨询一下医生，看看哪种隆鼻方法更适合，适合的才是最好的。

什么是玻尿酸隆鼻玻尿酸隆鼻就是通过注射的方式把玻尿酸注射到求美者鼻梁部位，然后对鼻子进行塑型，以达到使鼻子挺拔漂亮的效果。

玻尿酸隆鼻安全吗玻尿酸隆鼻目前是非常成熟的一种隆鼻方式，在各个环节上的防护都比较完善，还是非常安全的。

玻尿酸隆鼻的过程首先清洁对鼻子进行清洁并麻醉，然后根据鼻子的形状选定注射部位并进行注射玻尿酸，最后按照求美者的医院捏出漂亮的鼻型。

必须运动30分钟才消耗脂肪吗

运动超过30分钟可以消耗脂肪，但不代表人们运动时，人们在运动时只有超过30分钟才会燃烧脂肪，对于大众来说，平时我们在运动时，包括运动、做家务，其实都会严格消耗人体的热量，可能在运动的时候运动强度不一样运动运动时间不一样，产生的效果可能会有所不同，对于大众来说，他们在运动时首先会选择有氧运动，肌肉当中的糖原就会被利用，此刻糖原变少，之后就开始消耗糖原和血糖，并且还会消耗脂肪。

一般消耗脂肪的时候，大概在20分钟到30分钟的样子，当身体内所有的能量都在慢慢消失的时候，肯定就是以消耗脂肪为主要的供能来源。一般消耗脂肪的时候才是真正减脂的时候，可能在运动最初它并不是消耗脂肪的，而很多运动员他们需要长时间的运动，最终才会导致自己特别的瘦，因为在运动后期脂肪才能够逐步的分解，当人体内脂肪大幅度减少之后，才能够达到减肥的目的。

在现实生活中说到减肥，很多人都觉得适当的运动能够达到减肥的目的，不过大家需要注意在减肥的过程当中，我们也需要选择合适的运动方法，有部分小伙伴严格恪守减肥时，只有超过30分钟才能够达到燃脂的目的，虽然这种情况从表面来看是可行的，实际上是对减肥的误解。

人们在现实生活中想要达到减肥的目的，个人觉得应该是管住嘴迈开腿，所谓管住嘴就是严格控制饮食。由于大众每天都吃的特别的多，再加上不健康的饮食习惯，导致自己越来越胖，而我们想要减肥的时候，应该改变自身的饮食结构，另外小伙伴们在日常生活当中也需要多加运动，主要以有氧运动为主，建议小伙伴们选择适合自己的有氧运动。

在生活中有哪些食物里面富含大量的脂肪呢，多了解这些富含脂肪的食物，可以帮助各位减肥。

高脂肪食物是指含脂肪量高的食物，具体表现为油的成分就是各种饱和和不饱和脂肪酸，所以所有含油量高的和油炸过的食物都属于富含脂肪的食物。植物中的核桃、芝麻、花生，油炸食品、肥肉、动物内脏、奶油制品都属于富含脂肪食物。

食物中披萨是非常美味的，同时还具有饱腹感的食品，但是同时也是属于垃圾食品，一片中等大小的披萨就会给350至是500大卡的热量，因为披萨是大量的面粉以及各种肉类组成的还有很多的脂肪，所以这种食物里面富含脂肪非常丰富。汉堡里面也有大量的肉类、油炸食品，还有蔬菜等等，汉堡的脂肪含量非常高，尤其是这些肉饼都是经过油炸过，脂肪就会更高一些。

蝴蝶犬(详情介绍)

脂肪存在于动物的皮下组织中，是生物体的组成部分和储能物质，狗狗体内的脂肪含量通常为其体重的10%-20%。狗狗体内脂肪不仅能供给狗狗所需的能量，还能保护狗狗的内脏、维持体温、促进脂溶性元素的吸收、参与各种代谢活动等。所以，脂肪的摄入对狗狗来说非常重要。

对于幼犬来说，它们每日所需脂肪为每千克体重12克，成年犬则为1.1克，如果处于发育期，这一数字则应为2克。如果狗粮中缺乏脂肪，狗狗会患上脂溶性维生素缺乏症[1]，具体表现为夜盲、软骨症、溶血性贫血、公犬精子活力减退及性欲下降、母犬发情异常等。同时，由于脂肪的摄入不足，狗狗还有可能出现中枢神经系统功能障碍，严重影响狗狗的正常生活。

不过，如果狗狗脂肪摄入过多，又会造成另一个极端现象——肥胖。肥胖的狗狗比健康的狗狗更容易衰老，此外，它们还容易患上各类心血管和代谢性疾病。严重肥胖的狗狗甚至还会因为脂肪含量过多而缺氧和呼吸困难，最终导致心肺功能衰竭。如果肥胖的狗狗患病需要手术时，它们也要承担更多的风险。

因此，为了狗狗的健康，主人一定保证狗狗食物的营养均衡。

[1] 脂溶性维生素包括维生素A、D、E和K。

大家知道自体脂肪的好处是什么吗，自体脂肪的优点是什么呢，自体脂肪填充的优点有哪些呢，自体脂肪怎么填充好呢，今天就一起来看看吧！

自体脂肪填充额头的优点是什么

安全性较高自体脂肪填充丰额头最明显的有点是没有排异反应，相对来说比较安全。因为自体脂肪填充所移植的是受术者自身的脂肪颗粒，跟用其他丰额头手术比起来，自体脂肪的生物学特性更好，不会对身体产生副作用，更不用担心引起排异反应和免疫反应。手术效果较真实人的脂肪比较柔软，将自身的脂肪填充到额头，能让填充部位看上去较为协调，所以一般只要选择在正规的医院，请专业的医生进行自体脂肪填充丰额头术，带来的手术效果会更真实。

脂肪填充术后注意事项

1.进行自体脂肪填充后2到3天，是肿胀高峰期，所以抽脂后立即穿上塑身衣，这样可以帮助控制肿胀。

2.自体脂肪填充时，抽脂会导致皮肤局部有伤口，在伤口没有拆线之前，不要让抽脂部位的皮肤碰水，因为水中的细菌容易顺着伤口进入皮肤中，导致伤口发炎感染。

3.进行自体脂肪填充术初期患处会出现肿胀，酸痛等现象，甚至有的还会出现淤血，瘀伤，这是因为皮肤中的小血管在吸脂时被皮怀所致，大多数瘀伤慢慢会消失，大概一周内恢复，所以这段时间要注意多休息，避免术后出血。

自体脂肪填充效果更真实

脂肪属于较为柔软的物质，它的塑形能给填充部位较为协调的感觉，其中自体脂肪填充胸部就是典型例子，自体脂肪填充胸部会让胸部看起来更加饱满，手感也非常柔软。

如何提高自体脂肪存活率

自体脂肪取填充后，自体脂肪在填充部位的不稳定性或导致自体脂肪填充不能永久，需进行二次自体脂肪填充才能达到效果。在自体脂肪填充的时候，加入PRP(即自体血清)则可以将第一次自体脂肪填充的脂肪存活率提高至20%~30%。对此需要提醒的是，添加PRP必须严格按照国家标准进行操作，妹纸们在注射时要选择去正规整形医院进行。

据《连线》杂志报道，科学家们已经找到了一种不增加体重，想吃多少就吃多少的方法。

与吃低脂肪食物相比，吃含大量脂肪的食物很可能导致体内脂肪比例更高。然而，这种情况可能不会持续太久。英国科学家发现了一种防止脂肪被肠道吸收的方法。针对这些相同受体的药物的开发可能有助于解决由肥胖引起的健康问题。

今年5月公布的一项研究显示，到2035年，英国将有近500万人患有病态肥胖症。这一数字远远高于2015年的190万。根据英国国家健康服务(NHS)的数据，在欧洲，肥胖和超重导致至少1/13的死亡。

然而，由于今年前三个月麦当劳在英国的销售额增长了7.8%，我们似乎不太可能减少高脂肪食品的摄入。新的研究结果为另一个选择铺平了道路，那就是，人们可以继续吃高脂肪的食物，但身体脂肪不会增加。

这项发表在《科学》杂志上的研究，包括给老鼠喂食高脂肪食物8周。一些老鼠被喂食一种药物来阻止一种叫做血管内皮生长因子的蛋白质的产生。这种蛋白质还刺激血管，防止脂肪到达小淋巴管，脂肪通常通过小孔转移到肠道。

结果显示，在接受药物治疗的小鼠中，脂肪不能进入肠道中的小淋巴管。这些管道布置在肠道内，确保通过可渗透的毛孔摄入大部分膳食脂肪，也称为“连接”。

血管内皮生长因子-A抑制剂已经用于医学的其他方面，并且只在几个小时内起作用。利兹大学食品科学学院的麦基教授(没有参与这项研究)说:“虽然作者没有详细说明，但其含义是，如果这种机制也适用于人体，那么在进食前服用一种神奇的药丸可以阻止肠道吸收脂肪。”

该报告的作者之一、耶鲁大学的安妮·艾希曼说:“我们发现，关闭这些毛孔的分子机制抑制了老鼠对脂肪的吸收。大部分脂肪不会被组织吸收，而是随粪便排出体外。老鼠吃高脂肪食物时不会增加太多体重。”受体被阻断的老鼠体重没有增加，但是其他老鼠的体重增加了一倍。

艾希曼说，针对特定蛋白质(如血管内皮生长因子)的药物已被用于治疗青光眼患者，并正在测试其他病症。更重要的是，低水平的血管内皮生长因子已经被用来减轻乳腺癌患者的体重。

然而，研究表明这种疗法有一些副作用。例如，一些老鼠有水肿。这是因为阻断脂肪在肠道的吸收也会影响液体的吸收。然而，艾希曼说老鼠可以忍受这种情况。这种药物是否适合人类需要进一步研究。艾希曼说:“我们发现这些药物还可以封闭肠道淋巴管的毛孔，抑制脂肪的摄入。我们可能会测试对人体的降脂效果。”

研究人员建议下一步应该是研究这种药物对人类的影响，因为到目前为止它只在老鼠身上进行了试验。但这可能需要很长时间。麦基说:“如果你突然停止脂肪吸收，将会有潜在的副作用，所以我认为离人类应用还有很长的路要走。”

大家在生活中应该都听说过非常多的减肥办法吧，那么你了解怎么减脂最有效吗？今天小编就和大家一起来了解一下吧，究竟怎样减脂肪最有效，以及最有效的减脂办法有什么？跟着小编我们一起来学习吧。

怎样减脂肪最有效

一、控制总热量的摄入

减脂第一点肯定是要控制总热量的摄入了，这是十分关键的一点，看起来是非常简单，但是真正做起来是非常难的，很多人看到美食就经不起诱惑，嘴上说不吃，但是实际上吃了不少。摄入的总热量一定要少，这样减脂才能成功，否则减脂就会失败，要想减肥肯定是付出一些艰辛的。

二、保持有氧锻炼量

在减脂的过程中还有一个比较重要的就是经常做有氧运动，无氧锻炼是不可能让你减脂的，希望想减肥的人每天给自己安排一个固定时间进行有氧锻炼，时间不要太长，但是也不能太短，半个小时左右的有氧运动是最合适的。

三、力量锻炼不能少

很多女性在减肥的过程中只进行有氧运动了，不进行力量锻炼这是不可取的，因为没有力量锻炼肌肉就会变得松弛，那样就算瘦下来也会变得非常难看的。减肥的时候需要结合有氧运动和力量锻炼，这样才能达到最佳的瘦身效果。

最有效的减脂办法有什么

1.12分钟的自由泳消耗热量

时间短且热量消耗大的游泳运动是节省减肥时间的最好选择。同样是游泳，自由泳的运动量比较大，只需要12分钟就能消耗掉大量热量，赶快试一下吧！

2.每日1万步的行走能保持体型不反弹

以感觉稍稍有些出汗的速度，每天行走1万步，1个月就可以减重l千克。换算成时间，相当于每天行走2个小时，你可以用略快于平常的速度，行走4公里的距离。在台阶等有坡度的地方行走更为有效。

3.拉伸运动，一次坚持7秒效果最好

做拉伸运动时，应该选择适合自己的运动量，一般情况下，一个回合坚持7秒钟左右效果最好。通过拉伸运动来减肥，如果中途放弃，会造成适得其反的效果，所以一定要坚持！

4.慢跑20分钟以上就能出效果

有氧运动能充分燃烧体内脂肪，并不断输送氧分到身体各部分，是一种效果出众的减肥方法。慢跑属于有氧运动，进行20分钟后，体内的脂肪开始燃烧，达到减肥的功效。游泳、散步等也都属于有氧运动，可根据不同条件选择。

5.在37℃的热水中进行20分钟的半身浴

在37℃左右的水中浸泡能激活体内细胞，加快新陈代谢。悠然自得地沐浴于水中，可有效促进汗液排出，令你从内至外都娇艳动人。浴盆中20分钟的浸泡很有减肥功效。如果不喜欢运动，就用简单易行的半身浴，来完成减肥任务吧！

如何减脂不反弹

减肥不反弹的方法主要就是做好良好的饮食控制，同时也要加强活动锻炼。饮食还需要尽量做到多样化，但尽量不要吃一些太油腻的食物，主要是控制好饮食的总热量，同时也需要控制好饮食的总量。每天都需要适当的进行活动锻炼，比方说进行慢走或者是慢跑，或者是选择跳绳或者是打球等方法。至少要运动锻炼达到一个小时左右的时间，才有利于促进体重的下降，避免体重反弹。

减脂期间调整饮食的比例

饮食比例一定要调整合理，既然您已经下定决定要减肥了，那么就要减少脂肪的摄入，营养需求可以通过摄入蛋白质和碳水化合物。每顿饭吃个七成饱就可以了，可以少食多餐。

看零食是否会引起发胖，一般通常情况下脂肪和能量都要看，主要是看热量的。不管是蛋白质糖还是脂肪，最终转化的热量，才是引起脂肪堆积体的。热量高的食物，更容易发胖一些。

1、热量是指各种食物的能量，是它能为人体提供多少能量的体现，脂肪是一种营养物质，它的能量是用热量表示。

2、一般脂肪是产热较高的，肥胖是其它物质转化为脂肪储存在体内，热量多不一定会发胖，因为其它物质转化为脂肪要消耗很多热量，不一定会引起发胖，而且人体的新陈代谢需要热量，一般食物要有点热量才能保证我们精神状态，但脂肪过多超过人体基本的陈代谢所需就是发胖的原因。

3、采用科学的方法减肥，每天都要做有氧运动。饮食方面严格遵守和养成“早吃好，午吃饱，晚吃少”的饮食习惯，少吃甜食,，进食速度要慢，细嚼慢咽，这样容易消化，多喝水，多吃些水果蔬菜，少吃荤。

4、首先热量和脂肪量都要看，尤其是看热量，因为热量会转化为脂肪堆积。

5、摄入脂肪含量高的食物相对热量也高。而脂肪含量不高。摄入整体热量过高也照样容易影响到减肥的。

家里最常用的健身器材莫过于哑铃了。使用哑铃健身，可以非常良好的节约场地。不受过多的限制，并且价廉物美，是各阶层人士的优秀选择，使用哑铃该注意什么呢？进行哑铃锻炼的时候，应选择通风比较好的环境，尽量避免在空气混浊、气温寒冷或酷热的环境下练习。运动开始前，认真做好热身活动；运动结束后一定要做好放松运动；在锻炼时，不标准的动作很容易造成关节的伤害，这是由于在用哑铃练习的时候，关节受到的压力是很大的，动作稍有偏差，会造成关节的扭伤，小肌肉群肌纤维的拉伤等情况；切忌不能超重，超重的哑铃容易拉伤你的肌肉，反而达不到训练的效果；也不能太轻，太轻的哑铃根本达不到打造身材的目的。力量增加不能心急，要循序渐进，大家知道练哑铃能减脂肪吗？

双手紧握哑铃，通过上下前后左右地摆动双臂，哑铃的重量能适当地增加运动的强度。转动肩关节的同时，肩胛骨一张一闭，连平时无法运用的背部深层肌肉都能得到刺激，同时压力带来的压力，令双臂肌肉量增加，肌力提升了，自然加速新陈代谢，提高脂肪燃烧的速度。

配合其他部位的动作，例如扭腰、抬腿、下蹲、压臂等，令全身都能动起来，感受哑铃带来的压力，体内每个角落的脂肪都能燃烧起来。只需7分钟，坚持每天抽空做一做，在家里就能轻松并高强度地运动减肥。

一、持铃蹲伸

每天7分钟全身哑铃减肥操

两腿分开与肩同宽，两手各握住一个8-10磅重的哑铃，放在两脚之间。臀部内收，下蹲，膝盖不要超过脚趾。

收紧腹部，双腿下压，站直，双手向上举起越过头顶，两手维持肩膀宽度。然后再回到下蹲姿势，重复动作60秒。

二、侧举铃

两腿分开肩膀宽度，左手拿着一个8-10磅的哑铃，并举起右臂，左手在身侧自然下垂。 上身向右侧弯曲，右手五指并拢，掌心向下，下降至右脚前。同时左臂向上举，垂直于地面。注意两腿伸直。换边重复相同动作，共做60秒。

三、腹部背部哑铃平板

俯身成俯卧撑姿势，脚尖点地，两腿分开与肩同宽，两臂在肩膀正下方，各握住一个哑铃，保持头部到脚跟在一平面。保持姿势60秒。

四、平板式侧举铃

在平板式的基础上，保持躯干伸直，收紧腹部肌肉，左手抬离地面，向上举铃，同时头部抬起看向天花板。然后再回到原位，换边重复相同动作。交替重复60秒。

护理人员不仅要护理好患者的疾病，还要做好患者的生活的指导。根据患者的发病相关因素，给予患者合理的建议。比如肥胖的结肠癌患者，护理人员就要建议患者尽量少摄入脂肪高的食物，尤其是中老年患者。因为中老年患者的机体抗病能力下降，导致其复发几率要比其他患者大得多。那么，老人每天需要多少脂肪呢?小编今天就来介绍一下这方面的知识。

1.饮用脱脂奶或1%牛奶而非2%或全脂奶。

2.选择无脂肪的肉类如鸡胸肉或火鸡。

3.用蒸的方法去烹调蔬菜、饭及鱼类是上佳方法。水蒸不需另外加入油脂及令食物能保留塬有的营养素。

4.多进食鱼类——鱼类大多低脂，即使多脂肪的鱼类如叁文鱼或鲭鱼等也都含有健康的脂肪酸。

5.亲自泡制沙律酱料，将加入的油量减半及用有风味的醋，如含有香精或香脂的或龙蒿，拌入其他有趣的香料。如果太酸，可加入适量糖。

最新一期的《科学》杂志上有一篇非常有趣的论文。犹他大学的一个科学研究小组发现，免疫系统紊乱的老鼠会有肥胖症状，这是由肠道菌群失调引起的。沿着这条线发现的肠道菌群确实可以减少老鼠对脂肪的吸收，让它们活得更健康！

这一发现可以说是一种意想不到的喜悦。起初，研究人员只在老鼠身上突变了myd88基因(影响一类免疫细胞的生长)，干扰了它们的免疫反应。然而，没有人预料到这些老鼠的大小已经发生了显著的变化。根据论文第一作者查里斯·彼得森博士的说法，这些老鼠“像松饼一样肥”！

▲感受松饼大小的老鼠…(图片来源:参考)

▲两种肠道菌群的平衡是小鼠肥胖的关键(图片来源:参考资料

▲免疫系统通过影响肠道菌群来调节小鼠的代谢和肥胖(图片来源:参考[2))

然而，一旦IgA含量降低，肠道菌群就会紊乱，导致一些菌群变得疯狂，而另一些则被抑制。在这种情况下，梭菌被抑制。这个结果是，老鼠的肠道拼命吸收脂肪酸，导致明显的肥胖症状。

《科学》杂志对这项研究评价很高，并专门写了一篇文章介绍它。尽管这项研究是在老鼠身上进行的，但它对人类有着同样重要的意义——微生物和人类已经走了数百万年的漫长的共同进化之路，它们对我们来说一定具有重要意义。这项研究再次提醒我们微生物的重要性，并鼓励科学家探索它们对人类的影响。

用自体脂肪来丰胸是很常见的一种丰胸方式，自体脂肪丰胸可以利用多余的脂肪来达到丰胸效果，效果也十分自然，一般术后短时间内不能触摸。

自体脂肪丰胸多久可以同房

做完自体脂肪丰胸最好是一个月之后再同房，这是因为做完自体脂肪丰胸后，胸部的脂肪位置尚且没有稳定，新生的血管在挤压下容易破裂，挤压到胸部很还可能导致脂肪大量凋亡。因此，为了自体脂肪丰胸的效果能够较长时间保持，最好是等到自体脂肪丰胸后一个月再同房。为了保证效果，短时间内是不建议有过多的肢体接触的，但是如果不碰到乳房的话，其实是没有啥问题的。当然考虑后期的效果，建议最好是在一个月以后，具体的话，视个人情况而定。最后强调下，脂肪在体内完全稳定的话，则需要三个月左右的时间。所以即便一个月后可以进行夫妻生活，但是也要尽量避免挤压，揉捏乳房，以便影响脂肪的成活率。

自体脂肪丰胸后多久可以摸

在自体脂肪丰胸以后，爱美者自己也不能马上触摸胸部，一般需要等到两周时间过去，自体脂肪丰胸后15天才可以触碰。因为医生需要对手术部位进行反复上药消炎，将在自体脂肪丰胸部位敷好敷料，爱美者需要去医院更换敷料。一般整形医院的消炎时间是1星期左右，因此自体脂肪丰胸后还不可以马上触摸胸部，如果想要试试自体脂肪丰胸后胸部的手感，最好是等到两周时间后再自己触碰胸部。

术后护理

1、自体脂肪隆胸术后要保护胸部，防止胸外伤和猛烈挤压，局部避免锐器。

2、保持切口干燥清洁，拆线前勿见水，勿私自拆换敷料，自体脂肪隆胸术术后静脉抗生素5天口服消炎药7天。

3、自体脂肪隆胸术后2周严禁上肢大幅度外展上举，自体脂肪隆胸术后一个月加大上肢活动范围，自体脂肪隆胸术后七到十天坚持每天按摩1-2次每次15分钟。

丰胸建议

要做自体脂肪隆胸的人一定要去正规的医院有资质的医生进行手术，不要去那些没有资质的小美容院进行自体脂肪隆胸。在做了自体脂肪隆胸手术后，也要注意做好日常的护理。

圣伯纳犬(详情介绍)

脂肪是为身体提供热量的主要来源之一，而且脂肪还有着调节生理机能的作用。固然脂肪对身体有着诸多的作用及好处，但是我们也要控制好脂肪的摄入量，过多的脂肪非但对身体没有好处，反而还有着一定的影响。脂肪对于狗狗的作用有哪些，我们一起来了解一下。

脂肪是狗机体所需能量的重要来源之一。脂肪是食物中能量集中的源泉，它可增加食物的可口性，还可帮助脂溶性维生素的吸收。每克脂肪充分氧化后，可产生9.4×4.18千焦热量，比碳水化合物和蛋白质高2.25倍。脂肪进入狗体内逐渐降解为脂肪酸后被机体吸收。

大部分的脂肪酸在体内可以合成，但有一部分脂肪酸却不能在机体内合成或合成量不足，必须从食物中得以补充，这就称为必需脂肪酸，如亚油酸、花生四烯酸等。必需脂肪酸对狗的皮肤、肾脏功能及生殖非常重要，猪油和鸡内脏脂肪中就富含这两种脂肪酸。食物中脂肪缺乏时，可出现消化障碍和中枢神经系统的机能障碍，毛发干燥无光泽，腹侧脱屑，缺乏性欲，睾丸发育不良或母狗发情异常等现象。但脂肪储存过多，会引起发胖，同样也会影响狗的正常生理机能，尤其对生殖活动的影响最大。

通常幼狗每日需脂肪量为每千克体重1.1克，成年狗每日需要脂肪量按饲料于物质计，以含12%-14%为宜。

所以说事物都有其两面性，脂肪的摄入量过少会对身体造成一定的影响，而摄入过多同样有着诸多的弊端，因此我们一定要合理有效地安排狗狗喂食，保证其营养的均衡性。